高效液相色谱原理(高效液相色谱原理和操作)

一、高效液相色谱工作原理？

高效液相色谱法的原理是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测。

高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。

二、高效液相色谱手性分离原理？

被分析样品（气体或液体汽化后的蒸汽）在流速保持一定的惰性气体（成为载气或流动相）的带动下进入填充有固定相的色谱柱，在色谱柱中样品被分离成一个个的单一组分，并以一定的先后次序从色谱柱流出，进入检测器，转变成电信号，再经放大后，由记录器记录下来，在记录纸上得到一组曲线图（称为色谱图），根据色谱峰的峰高或峰面积就可以定量测定样品中各个组分的含量

三、高效液相色谱外标法原理？

1.方法不同

内标法是在分析样品的混合物中加入一定重量的纯物质作为内标，然后对含有内标的样品进行色谱分析，分别确定内标和待测组分的峰面积和相对校正因子。外标法是在空白溶剂中加入一定量的梯度标准物质制成对照品，并与未知样品平行处理检测。

2.要求不同

内标法对于内标的选择要有一定的原则，适合于小样本量的分析，而且样品中的所有组分都不要求达到峰值，只要内标和有关组分达到峰值并且分离良好..外标要求仪器具有可重复性，适用于大量分析样品，因为仪器会随着使用而变化，所以应定期进行曲线校正。

3.难易成度不同

内标法必须准确称量样品和内标，否则会影响实验结果，操作困难..外标法不需要测量校正因子。操作简单，计算方便。

四、超高效液相色谱串联质谱仪原理？

实验方法原理 高效液相色谱-串联质谱法，即以高效液相色谱为分离手段，以质谱为鉴定和测定手段，通过适当接口将两者连接成完整仪器。 试样通过液相色谱系统进样，由色谱柱分离，而后进入接口。在接口中，试样由液相中的离子或分子转变成气相离子，然后被聚焦于质量分析器中，根据质荷比而分离。最后离子信号被转变为电信号，由电子倍增器检测，检测信号被放大后传输至计算机数据处理系统。

五、高效液相色谱荧光法原理？

高效液相色谱法的原理是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测。

高效液相色谱法有“四高一广”的特点：

①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。

②高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。

③高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。

④高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。

⑤应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。

六、高效液相色谱基本原理？

1、高效液相色谱法的原理是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测。

2、高效液相色谱法有“四高一广”的特点：

（1）高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。

（2）高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。

七、高效液相色谱的正反色谱的原理是什么呢？高效？

简单的说：色谱分离的原理就是物质在固定相和流动相之间的分配系数存在差异，经过多次反复吸附解吸或者溶解挥发，最后达到分离。液相色谱就是流动相是液体。反相指固定相的极性小于流动相的极性。定性通过保留时间定量通过峰面积同一物质在相同色谱条件下保留时间一致，需要对照品比对定性。

同一物质的浓度与峰面积成正比例关系，所以根据对照品的浓度和峰面积，可以定量得出样品的浓度。不够详细，就这些吧！

八、什么是高效液相色谱？

高效液相色谱是一种色谱分离方法。它是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入待测样品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。

这种方法已成为化学、生化、医学、工业、农业、环保、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术，是分析化学、生物化学和环境化学工作者手中必不可少的工具。

九、高效液相色谱检测方法？

高效液相色谱法（High Performance Liquid ChromatographyHPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。

高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。

该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用。 历史 1903年俄国植物化学家茨维特（Tswett）首次提出“色谱法”（Chromatography）和“色谱图”（Chromatogram）的概念。

十、高效液相色谱通道设置？

1).首先对流动相进行过滤，根据需要选择不同的滤膜，一般为有机系和水系，常用的孔径为0.20um和0.45um。

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2).对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。

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3).正常情况下，仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟，然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂，则要二次重蒸水冲洗10-20分钟，直至色谱柱中有机相冲净为止)。

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4).一般情况下，流动相冲洗20-30分钟后，仪器方可稳定，最重要的是仪器基线走后，方可进样测试。

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5).同时进两针标样，将其结果相比较，其结果的比值在0.98-1.02之间后，就可以正式进行样品的测试了。

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6).样品测试结束后，就要进行色谱仪及色谱柱的清洗和维护。如流动相为缓冲试剂，同样也要用重蒸水清洗10-20分钟，方可用有机相进行保护，否则，有损色谱柱。

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7).关机时，先关计算机，再关液相色谱。

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8).填写登记本，由负责人签字