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液相色谱仪操作及原理(气相色谱仪操作及原理)

2023-04-04 18:29:46环境监测1

一、hplc原理及操作？

高效液相色谱法的工作原理:

流动相通过高压泵进入系统，样品溶液通过注射器进入流动相，流动相加载到色谱柱(固定相)中。由于样品溶液中各组分在两相中的分配系数不同，经过两相反复吸附-解吸分配后，各组分的运动速度有很大的不同。它被分离成一个单独的组件，然后依次从列中流出。当样品浓度通过检测器时，样品浓度被转换成电信号并传送给记录器，数据以地图的形式打印出来。

高效液相色谱仪操作步骤：

1).过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜。

2).对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。

3).打开HPLC工作站(包括计算机软件和色谱仪)，连接好流动相管道，连接检测系统。

4).进入HPLC控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。

5).有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵，直接在泵的出水口，用针头抽取。冲洗进样阀，需要在manual菜单下，先点击purge，再点击start，冲洗时速度不要超过10ml/min。

6).调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大，压力越大，一般不要超过2000。点击injure，选用合适的流速，点击on，走基线，观察基线的情况。

7).设计走样方法。点击file，选取selectusersandmethods，可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法，点击newmethod。选取需要的配件，包括进样阀，泵，检测器等，根据需要而不同。选完后，点击protocol。一个完整的走样方法需要包括：a.进样前的稳流，一般2-5分钟;b.基线归零;c.进样阀的loading-inject转换;d.走样时间，随不同的样品而不同。

8).进样和进样后操作。选定走样方法，点击start。进样，所有的样品均需过滤。方法走完后，点击postrun，可记录数据和做标记等。全部样品走完后，再用上面的方法走一段基线，洗掉剩余物。

9).关机时，先关计算机，再关液相色谱。

10).填写登记本，由负责人签字。

二、uplc原理及操作？

最小的延迟体积，最小的流通池，最小的管路体积，最小的unswept dead volumn,最精准的泵，最高的检测器灵敏度，在最短的时间里，使样品得到最有效的分离。由于使用2um以下粒径的柱子，所以要求系统耐受足够高的压力。可以理解为uplc在2-3分钟之内实现普通HPLC 10-20分钟的分离效果。

三、飞机飞行原理及操作？

飞机飞行原理是：飞机是靠机翼的上下气压差bai来提供升力的，因为只要飞机向前运动(无论是在跑道上滑行还是在空中飞行），机翼下方的气压机会大于机翼上方的气压。

如果你学过流体力学就会明白，伯努利方程就是飞机飞行的原理，而机翼就是根据这个原理设计的发动机的作用是给飞机提供向前的动力，也就是前面说的使飞机向前运动，但不是向上的动力,阻力带来升力是从空气存在的角度而言。

有空气存在就有阻力，正因为空气的存在，飞机飞行中克服阻力才导致机翼的上下气压差，机翼的上下气压差带来了升力。但实质上阻力带来升力不能充分说明飞机的飞行原理。飞机的飞行原理实际上跟飞机的即时速度有关，只要达到一定的速度，即使不存在阻力，飞机一样会飞行。

飞机操纵系统，是指传递驾驶员或自动驾驶仪的操纵指令，驱动舵面和其他机构以控制飞机飞行姿态的系统。根据操纵指令来源，可分为人工操纵（又可分为主操纵系统和辅助操纵系统）和自动控制系统。主操纵系统是通过驾驶杆（或驾驶盘）和脚蹬，即中央操纵机构来控制飞机的升降舵（或全动平尾）、副翼和方向舵的操纵机构来控制飞机飞行轨迹和姿态。辅助操纵系统包括调整片、襟翼、减速板、可调安定面和机翼变后掠角操纵机构等，用于控制飞机的运动状态。它们的操纵仅是靠驾驶员选择相应开关、手柄位置，通过电信号接通电动机或液压作动筒来完成。自动控制的指令来自系统的传感器，能对外界的扰动作出反应，以保持规定的飞行状态。常用的自动控制系统有自动驾驶仪、各种增稳系统和主控操纵系统。自动控制系统的工作与驾驶员人工操纵相互独立、互不妨碍。飞机操纵系统随着飞机的发展经历了由简单初级到复杂完善的发展过程，先后出现了人工机械系统、助力器操纵系统和电传操纵系统。20世纪70年代初出现了多余度设计的电传操纵系统，使用电信号和相应开关或手柄,以及导线电缆和电动执行机构来操纵舵面。已在许多民用飞机上使用。

四、gps测量原理及操作？

GNSS的基本原理是测量出已知位置的卫星到用户接收机之间的距离，然后综合多颗卫星的数据就可知道接收机的具体位置。

要达到这一目的，卫星的位置可以根据星载时钟所记录的时间在卫星星历中查出。而用户到卫星的距离则通过记录卫星信号传播到用户所经历的时间，再将其乘以光速得到（由于大气层电离层的干扰，这一距离并不是用户与卫星之间的真实距离，而是伪距（PR）：当GPS卫星正常工作时，会不断地用1和0二进制码元组成的伪随机码（简称伪码）发射导航电文。

PS:实际GNSS测量工作原理参照华测导航的GNSS大地测量产品的相关应用。

五、wayeal高效液相色谱仪操作？

1).首先对流动相进行过滤，根据需要选择不同的滤膜，一般为有机系和水系，常用的孔径为0.20um和0.45um。

2).对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。

3).正常情况下，仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟，然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂，则要二次重蒸水冲洗10-20分钟，直至色谱柱中有机相冲净为止)。

4).一般情况下，流动相冲洗20-30分钟后，仪器方可稳定，最重要的是仪器基线走后，方可进样测试。

5).同时进两针标样，将其结果相比较，其结果的比值在0.98-1.02之间后，就可以正式进行样品的测试了。

6).样品测试结束后，就要进行色谱仪及色谱柱的清洗和维护。如流动相为缓冲试剂，同样也要用重蒸水清洗10-20分钟，方可用有机相进行保护，否则，有损色谱柱。

7).关机时，先关计算机，再关液相色谱。

8).填写登记本，由负责人签字

六、如何操作高效液相色谱仪？

高效液相色谱仪操作步骤如下：

1、过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜.

2 、对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。

3 、打开hplc工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。

4 、进入hplc控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。

5、有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。

6、调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大，压力越大，一般不要超过2000。

7、设计走样方法。

8 、进样和进样后操作。

9 、关机时，先关计算机，再关液相色谱。

10 、填写登记本，由负责人签字。

11、流动相均需色谱纯度，水用20m的去离子水。

12 、柱子是非常脆弱的，第一次做的方法，先不要让液体过柱子。

13、所有过柱子的液体均需严格的过滤。

14、压力不能太大，最好不要超过2000 psi。

高效液相色谱法（HighPerformanceLiquidChromatographyHPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。它是在生化和分析化学中常用的柱层析仪。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法有效方便快捷地解决化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中得出想要的数据，成为重要的分离分析技术。

七、细胞转染的原理及操作？

脂质体转染操作步骤

(1)细胞培养：取6cm细胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105个细胞培养液，37℃ CO2培养密度至40%~60%，密度过大，转染后不利筛选细胞。

(2) 转染液制备：在EP管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量)

A液：用不含血清培养基稀释1ug 质粒DNA。

B液：用不含血清培养基稀释2ul脂质体。

分别将A液与B液轻弹混匀，静置5分钟。

(3)吸取B液加入至A液中，轻弹混匀。室温中置10-15分钟。

(4)转染准备：用1mL不含血清培养液漂洗两次，再加入4mL不含血清培养液。

(5)转染：把A/B复合物缓缓加入培养液中，摇匀，37℃温箱置6~24小时，吸除无血清转染液，换入正常培养液继续培养。

(6)瞬时转染后，可在48h-72h细胞长满之后，提取细胞蛋白或者RNA，验证敲减/过表达效率。

八、中速液相色谱仪的原理？

液相色谱仪利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异，对混合物进行先分离，而后分析鉴定的仪器。

液相色谱仪

液相色谱仪根据固定相是液体或是固体，又分为液-液色谱(LLC)及液-固色谱(LSC)。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较，具有、快速、灵敏等特点。

九、1206高效液相色谱仪操作流程？