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DNA如何检测饮用水中的病毒?

2023-01-08 22:31:06环境监测1

DNA分子杂交技术

把水中全部的遗传物质固定到一张膜上,然后把待测病毒的DNA用放射形元素标记好,在膜上培养,那么如果膜上有这种病毒,就会与其杂交,从而有放射性。
所以最后拿水冲洗膜,看膜上有没放射性就好

利用RT-PCR获得目的基因时,如何鉴定有没有DNA污染?如何设计实验防止污染?

先电泳看看带的大小对不对,如果目的带清晰,而且没有太多的其他杂带,则可以进一步测序,如果实验室有条件的,可以在测序前,把PCR产物连接到T载体上,然后T载体去测序,测序后进行比对,看看跟扩增的是不是目的基因,如果是,从测序可以看出没有出现漏碱基或是移码之类的。
如果电泳结果出现很多杂带(包含目的带),则说明特异性不强,需要重新做PCR,把退火温度重新设定一下,一般是把退火温度调些。如果退火温度调高了,还是有很多杂带,则说明你的引物特异性不强,需要再重新设计引物。
你指的DNA污染是指什么?提RNA时在最后一步时,加上DNA酶,保温一段时间,PCR时,可以做空白对照,如果边空白对照都能扩增出条带,则说明你的试剂盒或是蒸馏水污染了

DNA定量测定都有什么方法

1.紫外分光光度计测
2,荧光定量PCR测
3,用试剂盒测(有那种特异结合DNA的染料的试剂盒)

论述RT-PCR检测基因表达的实验步骤及如何判断并消除DNA污染所造成的影响。

RT-PCR实验,主要分为3步:
1. total RNA的提取
2. mRNA的反转录
3. 荧光定量PCR
由于字数限制,详细步骤可以参考下面网址。


消除DNA污染:
1. 按照说明书加入足量的Trizol,细胞过多会引起DNA污染。
2. 现在已经有去除基因组污染的反转录试剂盒,已经在很多实验室常用。你可以尝试一下。

HBV-DNA检测方法有哪些

长沙方泰肝病医院专家栗青艳教授介绍,通常情况下,病毒载量大于10的5次方是需要治疗的,但是这也要分两种情况,一种是处于肝炎的活动期,转氨酶高,这是需要抗病毒治疗的,还有一种情况,病毒载量也是大于10的5次方,但是病人的肝功是正常的,这些病人需要肝脏的穿刺检查,肝脏的活检。HBV-DNA检测方法有:斑点杂交法。此方法是传统的方法,成本比较低,但是灵敏度不高,精准度不高,出现假阳性的几率比较高,只能做定性检测,不能做乙肝定量检测,即只能检测DNA是阳性还是阴性,不能检测出乙肝病毒在身体内的含量。PCR法。PCR法是基因检测中使用最多的方法,是聚合酶链式反应的简称,是一种酶促反应。此方法可以在短时间内将待测基因扩增到上百万倍,这样可以大大提高基因诊断的准确度,保证此检查方法的灵敏度。分为三步,第一是对待测的基因进行PCR,然后电泳此结果,接下来就是对此结果进行分析。这样不仅可以定性乙肝病毒DNA检测,还可以定量检测,而且也可以判断基因段是否有缺失或者变异,这样可以准确判断病情。一般来说,HBV-DNA检测分为三步,第一是对待测的基因进行PCR,然后电泳此结果,接下来就是对此结果进行分析。这样不仅可以定性乙肝病毒DNA检测,还可以定量检测,而且也可以判断基因段是否有缺失或者变异,这样可以准确判断病情。更为重要的是,乙肝检查必须去正规的肝病专科医院,只有正规的医院才能保证检查结果的准确性,长沙方泰医院是全国首批开展乙肝病毒DNA基因检测技术治疗肝病专业医院之一。

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