液相色谱法的设备

一、液相色谱法的设备

高效液相色谱仪由输出泵、进样装置、色谱柱 、梯度冲洗装置、检测器及数据处理和微机控制单元组成。输出泵的功能是将冲洗剂在高压下连续不断地送入柱系统，使混合物试样在色谱中完成分离过程 。常用的进样方式有3种：注射器隔膜进样、阀进样和自动进样器进样。色谱柱的功能是将混合物中各组分分离。梯度冲洗又称溶剂程序，通过连续改变冲洗剂的组成，改善复杂样品的分离度，缩短分析周期和改善峰形，其功能类似于气相色谱中的程序升温。检测器的功能是将从色谱柱中流出的已经分离的组分显示出来或转换为相应的电信号，主要有紫外吸收检测器、荧光检测器、电化学检测器和折光示差检测器，其中以紫外吸收检测器使用最广。现代化的仪器都配有计算机，以实现自动处理数据、绘图和打印分析报告。

二、高效液相色谱仪有哪些主要组成部件,各有什么作用？

高效液相色谱仪由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。

储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相) 内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中做相对运动时，经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程。

各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。

扩展资料：

使用高效液相色谱时，液体待检测物被注入色谱柱，通过压力在固定相中移动，由于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同，不同的物质顺序离开色谱柱，通过检测器得到不同的峰信号，最后通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质。

高效液相色谱作为一种重要的分析方法，广泛的应用于化学和生化分析中。高效液相色谱从原理上与经典的液相色谱没有本质的差别，它的特点是采用了高压输液泵、高灵敏度检测器和高效微粒固定相，适于分析高沸点不易挥发、分子量大、不同极性的有机化合物。

参考资料来源：百度百科-高效液相色谱仪

三、液相色谱仪的使用方法以及注意事项有哪些？！

液相色谱仪的品牌、种类很多，各家的使用方法也不尽一样，主要看你是那一款的液相色谱仪，当初购买设备时，厂家的工程师会培训使用方法。建议你还是多跟你的设备厂家的工程师联系，发一份岛津LC－10ATvp的液相色谱仪作业指导书你参考一下，内容也包含使用中的注意事项。

LC－10ATvp的液相色谱仪作业指导书

1.目的

规范LC－10ATvp液相色谱仪使用及维护保养操作规程，使其能在正常条件下工作。

2.范围

适用于岛津LC-10ATvp高效液相色谱仪的使用和维护。

3.责任人

检测员、设备管理员

4.内容

4.1系统组成

SPD-10Avp 检测器，LC-10ATvp泵，N－2000工作站。

4.2 操作方法

4.2.1开机前检查

储液瓶倒净，换上实验需要的流动相（抽滤并超声过的）。

4.2.2开机

按溶剂输液泵上的power键，待自检完毕后开始进行操作。

4.2.3排气

逆时针旋转排气阀（不可超过180°）,打开排气阀，按purge键排气泡，在此期间流动相连续流出并且无气泡；按purge键，泵停止，将排液阀旋钮顺时针方向旋转到底，关闭排液阀

4.2.4冲流动相

按Pump键，泵启动，观察屏幕上压力显示，压力上升平稳后，继续按上述方法升高流速，使流速上升到实验需要的流速。

4.2.5进样

打开检测器，调节波长为实验需要的波长；打开工作站，查看基线，待基线走平后，进样。

4.3 使用后维护

4.3.1 水或含水甲醇溶液冲洗

使用结束后，将流速降到0.1 ml/min，按Pump键，泵停止。换下流动相，换上已抽滤并超声过的纯净水或含水甲醇溶液。按Pump键，泵启动，观察屏幕上压力显示，压力上升平稳后，继续按上述方法升高流速。如流动相含有无机盐，必须保证足够的冲洗时间。

4.3.2甲醇溶液冲洗

换上已抽滤并超声过的甲醇溶液，按3.1的操作进行封柱处理。

4.4 关机

按Pump键，关闭泵；关闭桌面在线工作站；按Power键关闭LC-10ATvp。

5.注意事项

5.1 不能使用浓硫酸、浓硝酸、二氯乙酸、丙酮、二氯甲烷、氯仿、二甲基亚砜等作为流动相。

5.2 流动相溶剂选择HPLC为准的溶剂，使用前必须用过滤器(0.45μm以下)

除去微粒或尘埃。

5.3 流动相溶剂必须进行脱气。若不脱气则在溶剂混合时或压力、温度变化时容易产生气泡，会引起泵的误动作和生产检测器信号噪音。

5.4 以硅胶作载体的化学键合填充剂的稳定性受流动相pH值的影响，使用时应详细阅读该柱的说明书，在规定的pH值范围内使用。使用时，可在泵与进样器之间连接一硅胶柱，以保护分析柱。当使用高PH或含盐的流动相时，尽可能缩短使用时间，用后立即冲洗。

5.5 分析结束后，从色谱流路系统，泵、进样器、色谱柱至检测器流通池，均应充分冲洗，特别是含盐的流动相，更应注意先用水、再用含水甲醇溶液充分冲洗。如发现严重故障，应与厂家联系维修。

5.6 请在使用前充分阅读作业指导书，不得擅自拆卸仪器的零部件。

6.日常维护

6.1 维护周期

15-30天为一个周期。

6.2 维护前准备

6.2.1 擦去前面板和主箱盖上的灰尘。

6.2.2 使用纸或软布沾少许水擦去键板上的灰尘。

6.3 检查控制面板

6.4 管路彻底清洗

6.4.1将储液瓶中的流动相更换为异丙醇或30%异丙醇或10%异丙醇，放入吸滤器。

6.4.2松开柱两端的螺帽，从管路中卸下色谱柱，在原来界色谱柱的位置接一阻力管（0.1mmI.D.×2m长）或接一空的预柱管。

6.4.3按“pump”键，设定流速为1-2ml/min，输液2小时。

6.4.4更换甲醇，设定流速为1-2ml/min，输液1小时。

6.4.5更换水，设定流速为1-2ml/min，输液1小时。

6.4.6更换甲醇，设定流速为1-2ml/min，输液1小时。

6.5维护后的漏夜检查

维护后，启动泵输液，检查管路中是否有漏液，如果存在漏液，采取适当措施。