生化实验类型

一、生化实验类型

大分子物质水解反应

生物对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用，必须靠产生的胞外酶将大分子物质分解才能被微生物吸收利用。胞外酶只要为水解酶，通过加水裂解大的物质为较小的化合物，使其能被运输至细胞内。

淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精、双糖和单糖；脂肪酶水解脂肪为甘油和脂肪酸；蛋白酶水解蛋白质为氨基酸等。这些过程均可通过观察细菌菌落周围的物质变化来证实；淀粉遇碘液会产生蓝色，但细菌水解淀粉的区域，用碘测定不在产生蓝色，表明细菌产生淀粉酶。脂肪水解后产生脂肪酸可改变培养基的pH，使pH降低，加入培养基的中性红指示剂会使培养基从淡红色变成深红色，说明胞外存在着脂肪酶。

糖发酵试验

糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应，在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异。有些细菌能分解某种糖产生有机酸（如乳糖、醋酸、丙酸等）和气体（如氢气、甲烷、二氧化碳的等）；有些细菌只产酸不产气。例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气；伤寒杆菌分解葡萄糖产酸不产气，不能分解乳糖；普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气，不能分解乳糖。

发酵培养基含有蛋白胨，指示剂（溴甲酚紫），倒置的德汉氏小管和不同的糖类。当发酵产酸时，溴甲酚紫指示剂可由紫色（pH6.8）变为黄色（pH5.2）。气体的产生可由倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明。

IMViC反应

IMViC反应是吲哚试验、甲基红试验、伏-普试验和柠檬酸试验4个试验的首字母缩写。这四个实验主要是用来快速鉴别大肠杆菌和产气杆菌，多用于水的细菌检查。

吲哚试验：某些细菌有色氨酸酶，能分解蛋白胨中的色氨酸形成吲哚（靛基质），吲哚能与对二甲基氨基苯甲醛作用生成玫瑰吲哚而呈红色。

甲基红试验：某些细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸进一步被分解成为甲酸、乙酸、琥珀酸等，使培养基pH下降至4.5以下，加入甲基红指示剂可呈红色。如细菌分解葡萄糖产酸量少，或产生的酸进一步转化为其他物质（如醇、醛、酮、气体和水），培养基pH在5.4以上，加入甲基红指示剂呈橘黄色。本试验常与V-P试验一起使用，因为前者呈阳性的细菌，后者通常为阴性。

伏-普（二乙酰）试验：某些细菌能发生如下转换：葡萄糖→丙酮酸（脱羧）→乙酰甲基甲醇→2，3—丁烯二醇，在有碱存在时氧化成二乙酰，后者和胨中的胍基化合物起作用产生粉红色的化合物。本试验目的在于测定细菌产生乙酰甲基甲醇的能力。

柠檬酸试验：当细菌利用铵盐作为唯一氮源，并利用柠檬酸盐作为唯一碳源时，若细菌能利用这些盐作为氮源和碳源而生长，则能利用柠檬酸钠产生碳酸盐，从而与利用铵盐产生的氨反应，形成NH4OH，使培养基呈碱性，使指示剂溴麝香草酚蓝（BTB）由淡绿转为深蓝。

二、做一次尿素碳14呼气试验需要进行多长时间，多久可以出结果呢？

中核海得威公司的尿素碳14呼气试验进行一次前后需要15~25分钟，做完马上可以检测出结果，该试验比较快速简便。

三、甲烷，氢气，CO，将其中两个并到一起一针测出，求助

甲烷，氢气，CO，将其中两个并到一起一针测出

如果确定你的样品中只有CH4、H2和CO的话，建议用氢气做载气，GC-TCD检测。然后氢气的浓度=1-CH4浓度-CO浓度

四、碳13呼气试验后排便什么颜色

碳13尿素呼气试验是一种用来检测幽门螺杆菌的医学试验。幽门螺杆菌是一种可以在胃中生长的细菌，可导致胃炎、消化性溃疡，并与胃癌密切相关，所以如果能及早检测出是否感染此菌，并对症下，将减少胃肠道炎症和溃疡等疾病的机会。碳13尿素呼气试验是最新、快速、无痛苦而且无辐射的幽门螺杆菌检测技术，不需要做胃镜，只需轻松呼气，测定呼气成份，立即能检测出是否有幽门螺杆菌感染，结果准确度高达97%。

碳13呼气试验通常在空腹状态或餐后2小时后进行。患者需憋气5秒钟，吹气收集第一袋呼气；然后口服碳13尿素试剂，静坐30分钟后，再次吹气收集第二袋呼气。检测结果大概需要10分钟。

有些情况会影响检测结果。比如，近一个月使用了杀灭幽门螺旋杆菌的抗生素患者；近两周使用了抑制胃酸物的患者；大量吸烟、肺功能低下等人群。

五、鉴别氢气、二氧化碳、甲烷需要的试剂是？

CO2通到澄清氢氧化钙的溶液有沉淀，氢气甲烷燃烧蓝色火焰，但甲烷燃烧生成物有CO2

六、设计一个实验，鉴别氢气，一氧化碳，甲烷写出实验步骤，实验现象和结论）

分别点燃 在火焰上方罩干冷烧杯 如没有水珠产生的是 一氧化碳

过一会迅速倒转烧杯到如少量澄清石灰水 澄清石灰水变浑浊 则是甲烷 没有明显变化的是氢气